欧李多糖的制备、结构表征及免疫调节活性研究

荦荦1  王 锐2  董兆斌3  廖玉美4  王国良1  张润光1  张有林1*

前言

欧李(Cerasus humilis (Bge.) Sok.)为蔷薇科樱桃属落叶小灌木，主要分布在黑龙江、吉林、辽宁等省区，是我国大西北干旱区域造林的先锋树种，也是我国的特有果树。欧李果实鲜红饱满，果肉具特殊香气，含钙量极高，被誉为“钙果”，是天然钙素来源和保健水果，也是“第三代功能水果”之一。欧李果实富含多种糖类、有机酸、氨基酸、维生素及矿质元素，是一种具有较高营养价值的水果。欧李种仁为药食同源的中药材郁李仁。多糖是一类大分子聚合物，具有免疫调节、抗肿瘤、抗癌、抗菌、抗氧化等多种药理活性。近年来用欧李果实深加工研发的产品有欧李果汁、果脯、果酒等，但关于对欧李多糖的研究鲜有报道。本文以陕西榆林沙地栽培的欧李为原料，对其多糖制备、结构特征及免疫调节活性进行研究，旨在为我国欧李资源开发利用提供理论基础和技术支持。

代表性结果

讨论与结论

巨噬细胞是评估生物活性成分免疫调节功能的重要载体。巨噬细胞通过分泌多种细胞因子如一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6( IL-6)、干扰素-β(IFN-β)、白介素-1(IL-1)等来发挥其免疫功能。植物多糖通过调节巨噬细胞中细胞因子的分泌量来调节其免疫功能。NO作为重要的信号分子介导细胞内多种生物学功能，有助于杀死肿瘤细胞和病原微生物。TNF-α可由激活的巨噬细胞产生，能直接参与维护免疫内稳态，包括炎症、分化、脂质代谢和凋亡等。有关研究表明，IL-6可由多种细胞分泌产生，被认为是在诱导急性期蛋白反应期间与发热有关的最重要的免疫调节介质。IFN-β参与抗病毒免疫，减少T细胞增生，诱导树突状细胞生长、成熟及活化，抑制B细胞和T细胞凋亡。这些细胞因子主要是免疫细胞分泌的一些小分子蛋白质，在机体的免疫和炎症反应中发挥重要作用。Yao等研究发现绿豆多糖显著增加了巨噬细胞中NO、TNF-α和IL-6的释放。Du等研究发现无花果多糖可以显著促进细胞毒性分子(NO)和细胞因子(TNF-α和IL-6)的分泌以及RAW264.7巨噬细胞的吞噬作用。Ren等研究了沙蒿籽多糖对RAW 264.7细胞的影响，发现沙蒿籽多糖能显著促进RAW 264.7细胞中NO、TNF-α、IL-6和IFN-β的分泌。这与本实验得出的欧李多糖能显著促进RAW 264.7细胞中NO、TNF-α、IL-6及IFN-β细胞因子释放的结果相一致，表明欧李多糖具有免疫调节活性。

采用水提醇沉法提取欧李多糖，得到最佳提取工艺条件为提取温度79℃，提取时间2h，液料比16：1(mL/g)，欧李干粉多糖得率为(32.18±0.08) %。CHPP-1、CHPP-2中多糖含量分别为99.16%和99.33%。CHPP-1的主要单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖：半乳糖醛酸：半乳糖=51.4：20.29：17.36，分子量为47.26 kDa。CHPP-2的主要单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖：半乳糖醛酸：半乳糖=41.81：28.24：11.68，分子量为22.94kDa。欧李多糖为吡喃环型多糖。CHPP-2在20～640μg/mL浓度范围内能激活巨噬细胞，显著促进NO、TNF-α、IL6及IFN-β细胞因子的释放，且具有剂量依赖性，说明欧李多糖有一定的免疫调节活性。该研究成果发表在《天然产物研究与开发》2022年第５期，欢迎引用(点击左下方“阅读原文”可查看全文)。

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