体外降胆固醇活性柠檬内生菌的分离筛选及鉴定- 大数跨境

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体外降胆固醇活性柠檬内生菌的分离筛选及鉴定

天然产物研究与开发

2022-07-09

导读：本文运用连续稀释平板法结合高效液相色谱法对柠檬内生菌进行分离并对其降胆固醇活性进行筛选，优选得到具有降脂功能的益生菌。

冯瑞章1† 田婧2† 韩睿康2 陈文凤2 刘艳丽 2 魏琴1* 梁寒峭2* 张勇波3

1 宜宾学院生命科学与食品工程学院香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室

2 北京城市学院生物医药学部

3 宜宾市龙茂柠檬种植有限公司

前言

随着科技的发展和人们生活水平的提高，人们对高脂血症和高胆固醇问题的关注日益广泛。据统计，全世界每天因高脂血症引发的心血管疾病死亡人数近4000人之多，我国每年因高血脂引起的动脉粥样硬化、冠心病、高血压、脑中风等心脑血管疾病所导致的死亡人数以每年12%的速度递增。为了减少由于肥胖导致的诸多并发症的产生，近年来开始有更多研究偏向于通过食疗方式降低血脂从而减少引发的疾病，国外文献研究尝试用乳酸菌结合饮食来调节脂肪代谢异常等问题，同时另有研究得出结论，有益乳酸可以直接改善脂肪质量和葡萄糖不耐受的合并健康问题，从而改善肥胖问题。

据多项研究结果表明微生物中的不同种类的益生菌具有降胆固醇和改善肠道菌群的作用，例如TMC3115可以改善老年人的肠道微生物和糖脂谱。且证实降脂作用和改善肠道菌群的作用直接或间接与微生物作用有关，其中的降脂活性与微生物的种类有关。例如通过对非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群的研究发现，药物治疗仍然是现在最主要的方法，但是双歧杆菌三联活菌联合其他药物也可以对改善肠道菌群从而降低胆固醇起到良好的效果而且在目前来看，在治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)方面的报道较少。

柠檬(Citrus limon (L.) Burm. f.)，为双子叶植物纲芸香科柑橘属植物，又叫益母果，来源于东南亚，现四川宜宾为国内主产区之一。柠檬无论作为中药材还是水果食用，口感都较酸涩，通过发酵形式制作成发酵汁后食用较容易被接受。国内对于酵素研究近几年刚刚兴起，并不断出台新政策和法律法规，但是对于中药材直接加工为饮品的方式研究几乎为空白。本实验拟采用微生物技术，将柠檬运用发酵手法进行加工，对其中的益生菌培养分离，并对分离出的菌种进行鉴定以及降脂活性的筛选，以达到优选得到具有降脂功能的益生菌目的。可为后期降胆固醇益生菌的应用进行理论依据的提供。

代表性结果

讨论与结论

本试验以胆固醇为底物，采用高效液相色谱法筛选柠檬内生菌的胆固醇降解率，再结合16S或26S rDNA基因序列鉴定。筛选获得25%以上胆固醇降解率的菌株17株，鉴定结果为酵母属16株和醋酸杆菌1株，分别为卡氏假丝酵母，季也蒙毕赤酵母，异常威克汉姆酵母，膜醭毕赤酵母和加纳醋杆菌。

最早Shaper实验室1963年发现非洲某些部落大量饮用乳杆菌发酵的乳制品后，体内血清胆固醇含量普遍较低。研究发现普通动物粪便中排泄的胆固醇比无菌动物排泄的多，而且当给这两种动物同时喂食高胆固醇食物时，无菌动物血液中的胆固醇含量是普通动物的两倍，这暗示肠道中定居的微生物可能会对肠道中胆固醇的吸收有一定的影响。迄今，有大量实验证实不同种类的乳酸菌具有降低胆固醇的效果，其中以嗜酸乳杆菌的材料最为丰富。

本实验筛选出多株酵母菌和醋酸杆菌具有降低胆固醇的效果，为后期降脂发酵食品或药品的开发提供了更多的菌种选择。该研究成果发表在《天然产物研究与开发》2022年第6期，欢迎引用(点击左下方“阅读原文”可查看全文)。

引用格式：冯瑞章,田婧,韩睿康,等.体外降胆固醇活性柠檬内生菌的分离筛选及鉴定[J].天然产物研究与开发,2022,34:954-959. Feng RZ,Tian Q,Han YK,et al. Isolation,screening and identification of lemon endophyte with high cholesterol-reducing activity in vitro[J].Nat Prod Res Dev,2022,34::954-959.