UPLC指纹图谱结合多元统计分析的吴茱萸与制吴茱萸成分变化研究- 大数跨境

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UPLC指纹图谱结合多元统计分析的吴茱萸与制吴茱萸成分变化研究

天然产物研究与开发

2022-09-12

导读：本研究建立吴茱萸及制吴茱萸指纹图谱，并结合多元统计分析吴茱萸与制吴茱萸中化学成分的变化。

杨文惠1, 2 吕渭升1, 2 孙冬梅1, 3 罗文汇1, 2 杨洁1, 2 何民友1, 2 潘礼业1, 2 李振雨1, 2*

1 广东一方制药有限公司

2 广东省中药配方颗粒企业重点实验室

3 江西一方天江药业有限公司

前言

吴茱萸，始载于《神农本草经》，被列为中品。吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia rutaecarpa (Juss.) Benth.、石虎Euodia rutaecarpa (Juss.) Benth. var. officinalis (Dode) Huang或疏毛吴茱萸Euodia rutaecarpa (Juss.) Benth. var. bodinieri (Dode) Huang的干燥近成熟果实。8~11月果实尚未开裂时，剪下果枝，晒干或低温干燥，除去枝、叶、果梗等杂质。吴茱萸具有散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻的作用，临床用于厥阴头痛，寒疝腹痛，寒湿脚气，经行腹痛，脘腹胀痛，呕吐吞酸，五更泄泻。现代研究表明，吴茱萸具有舒张血管、抗炎、镇痛、抗菌、中枢保护、止吐止呕等多种作用。吴茱萸与其甘草汁炮制品(以下简称“制吴茱萸”)的药理作用有所不同，其原因可能与吴茱萸炮制前后化学成分的变化有关。吴茱萸经甘草汁炮制后，能降低吴茱萸毒性，缓和燥性。

吴茱萸中的化学成分众多，药理活性复杂。其主要的化学成分包括生物碱、苦味素、黄酮和挥发油等。由于中药中化学成分的多样性及复杂性，单一成分定量的化学成分质量控制模式不仅缺乏专属性，而且难以反映中药的内在质量属性。因此，需要准确阐述吴茱萸及制吴茱萸中各类成分的变化，总结炮制前后药效成分变化的规律，才能更全面地解释其药理活性与临床作用的不同。近年来，新仪器、新技术的大量涌现，使得指纹图谱以及化学模式识别成为中药材质量研究的主流，指纹图谱结合化学计量学分析方法对中药的整体质量控制提供了一种新的思路。

本研究采用超高效液相色谱(UPLC)技术，建立吴茱萸及制吴茱萸指纹图谱，结合相似度评价和多元统计分析方法聚类分析(CA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)进行综合评价，从多角度分析吴茱萸炮制前后的差异性成分，初步探讨了吴茱萸与制吴茱萸药理作用与化学成分的相关性，一定程度上阐释了吴茱萸炮制前后药理作用改变与化学成分变化之间的联系，可以为吴茱萸的质量及炮制研究提供数据参考。

代表性结果

讨论与结论

吴茱萸指纹图谱的建立，一方面可以对不同产区的吴茱萸质量进行初步的评价，另一方面也能够明显区分出吴茱萸与制吴茱萸，吴茱萸指纹图谱共标识出27个共有色谱峰，制吴茱萸新增共有色谱峰28，为甘草酸，由制吴茱萸炮制后产生，利用此峰可以明显区分吴茱萸生品和炮制品。相似度评价结果显示，除4批江西产区的样品外，其余产地吴茱萸指纹图谱相似度较高。其中湖南产区出现1批相似度异常，可能与采收时间、产地加工方式的不同有关。通过正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)找到6个差异标志物，对其影响显著性排序，分别为甘草酸>吴茱萸碱>峰3>峰1>绿原酸>峰 2。

中医理论认为，中药吴茱萸性热苦寒，有散热止痛、降逆止呕之功，用于治疗肝胃虚寒、阴浊上逆所致的头痛或胃脘疼痛等症。而甘草性平，味甘，具有补脾益气，缓急止痛，调和诸药的作用。因此，吴茱萸经甘草汁炙后，一定程度能降低毒性、缓和燥性，适用于脾胃虚弱者。吴茱萸经甘草汁炮制后除增加甘草酸外，其余5个差异标志物，平均峰面积均呈下降趋势，有报道指出吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素对人胚肾细胞有一定的毒性作用，因此，吴茱萸炮制后吴茱萸碱等化学成分含量的降低，是制吴茱萸炮制后毒性降低的原因之一。也有研究表明，吴茱萸不同组分均具有毒性，强度为挥发油＞全组分＞醇提组分＞水提组分，因此，制吴茱萸在炮制过程中，由于受热，挥发油含量降低，使得其毒性减弱，同时，绿原酸等酚酸类成分因热不稳定，含量降低，也使吴茱萸药效更加缓和。

本研究采用超高效液相色谱(UPLC)法建立吴茱萸与制吴茱萸指纹图谱，该方法专属性强，重复性好，初步探讨了吴茱萸与制吴茱萸药理作用与化学成分的相关性，一定程度上阐释了吴茱萸炮制前后药理作用改变与化学成分变化之间的联系，可以为吴茱萸的质量及炮制研究提供数据参考。该研究成果发表在《天然产物研究与开发》2022年第8期，欢迎引用(点击左下方“阅读原文”可查看全文)。

引用格式：杨文惠,吕渭升,孙冬梅,等.UPLC指纹图谱结合多元统计分析的吴茱萸与制吴茱萸成分变化研究[J].天然产物研究与开发,2022,34:1301-1310. Yang WH,Lyu WS,Sun DM,et al.Study on the changes of components in Euodiae Fructus and prepared Euodiae Fructus by UPLC fingerprint combined with multivariate statistical analysis[J].Nat Prod Res Dev,2022,34:1301-1310.