吴 娟1,3 龚友兰2 滕建裕4 王雅静3 冯 敏3 周思倩1,3 龙红萍1,3*
4 湖南省湘西土家族苗族自治州凤凰县林业局
凤凰雪茶，又名藤茶、莓茶、甘露茶、甜茶藤等，由葡萄科(Vitaceae)蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)木质藤本植物显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata (Hand.-Mazz.) W.T.Wang)茎叶制成的代用茶，是湘西土家族苗族自治州特产的一种药食两用中草药茶，经加工炮制后泡茶饮用，安全无公害，具有良好的保健功效，在民间应用多样，迄今为止已有数百年历史。据传统本草古籍和民族医(药)典记载，凤凰雪茶叶味甘淡，性凉，具有平肝降压、清热解毒、活血通络、利湿消肿等功效，可用于黄疸肝炎、咽喉痛目肿痈疖、咽喉肿痛等症的治疗。凤凰雪茶产业已逐渐成为推动凤凰乡村振兴、农民发家致富的支柱产业，然而目前藤茶仅收录于《福建省中药材标准》、《湖南省中药材标准》、《广西壮族自治区壮药质量标准》三个地方药材标准，对藤茶产业的持续发展造成一定阻碍。现代药理研究表明，藤茶具有免疫调节、抗氧化、抗癌、降血糖、降血脂、清热解毒等作用。黄酮类是藤茶中含量最高的化合物，高达43%以上，尽管在化学成分分析方面的研究已经取得了进展，但尚缺乏对凤凰雪茶中的有效成分进行系统研究。
超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS)具有高灵敏度、高选择性、高分辨率、扫描范围广的特点，通过高分辨质谱提供的精确准分子离子峰和二级质谱信息并结合数据库可快速完成对具有复杂成分的中草药进行定性分析。全球天然产物交互分子网络(global natural products social molecular networking,GNPS)是近年发展起来的可视化鉴定技术，根据化合物特征碎片离子相似性生成可视化的分子网络图，同一类化合物在分子网络表现为一簇，借助GNPS技术，可通过已知的化合物发现潜在的未知同类化合物。因此，本研究首先采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术并结合分子网络对凤凰雪茶的化学成分进行系统分析，对凤凰雪茶资源合理地开发利用、明确药效物质基础具有重要意义。
本研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS联和GNPS技术，基于质谱的高分辨率特点以及GNPS数据库对二级质谱数据的可视化分析可以快速系统地鉴定凤凰雪茶中的化学成分以及潜在未知化合物，根据精确相对分子质量、化合物裂解规律、对照品比对及文献数据库共鉴定出58种化合物，包括33个黄酮类、11个酚类、4个生物碱类、3个三萜类和其他类化合物。此外，本研究还从葡萄科蛇葡萄属中首次鉴定出杨梅素-3-芸香糖苷、原儿茶酸-4-葡萄糖苷、积雪草酸等32个化合物，其中包括了一系列未经报道的双黄酮类化合物，但双黄酮类成分鉴定结果相对较少，一部分原因是存在同分异构体而无法通过质谱信息进行区分，如精氨醇及其异构体的分辨，另一部分原因是由于数据库及现有报道中对于双黄酮类化合物特征碎片信息收集和研究较少，后续将进一步对双黄酮类化合物进行鉴定、含量测定以及药理作用的活性研究。
现代药理学研究表明，凤凰雪茶提取物主要的药理活性成分为黄酮类和酚类，其中所鉴定的二氢杨梅素、杨梅素等具有重要的生物活性和药理作用，如降血糖、降血脂、降血压、抗菌、抗炎镇痛、保肝以及抗肿瘤等众多药理作用，同时凤凰雪茶表现出的较强的抗氧化活性可能与本研究中所鉴定的二氢杨梅素、杨梅素、槲皮素等黄酮类以及没食子酸、没食子酰-β-D-葡萄糖等酚类有关。迄今为止，对于凤凰雪茶药理作用研究多集中在黄酮类化合物的治疗作用，但其作用机制以及其他类别化合物的药理活性仍有待深入探究。本研究还通过与同属植物对比发现，蛇葡萄属植物都含有大量黄酮类如杨梅苷、槲皮苷和酚类化合物如没食子酸，但该属植物间化学成分组成仍存在差异，其中二氢杨梅素、杨梅素只存在于大叶蛇葡萄、显齿蛇葡萄及广东蛇葡萄中，且含量相对较高，而二氢杨梅素作为显齿蛇葡萄属中含量最多的成分在蛇葡萄属中研究最为深入。
本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS联和GNPS技术系统地分析凤凰雪茶的化学成分，并对主要成分黄酮类进行潜在新化合物的探究，为后续探究凤凰雪茶化学成分的药效组分筛选、药效物质基础研究及质量控制方法提供参考，并为推动凤凰雪茶这一民族中草药的提取制备工艺、生物医药保健食品的开发以及品质提升等提供重要的科学依据。该研究成果发表在《天然产物研究与开发》2024年第9期，欢迎引用(点击左下方“阅读原文”可查看全文)。
引用格式：吴 娟,龚友兰,滕建裕,等.基于UPLC-Q-TOF-MS/MS联和GNPS技术对凤凰雪茶的化学成分分析[J].天然产物研究与开发,2024,36:1484-1498.Wu J,Gong YL,Teng JY,et al.Chemical composition analysis of Fenghuang Xuecha based on UPLC-Q-TOF-MS/MS coupled with GNPS[J].2024,36:1484-1498.
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