编者按：肝癌恶性程度高，发病率高。目前认为肝癌的迁移和侵袭是导致肝癌患者预后不良的重要因素，但具体机制尚不清楚。在2021年10月召开的第29届欧洲消化疾病周（UEGW）学术会议上，中国贵州省遵义医学院附属医院Ding等口头报告了一项研究（大会摘要号：OP140），探讨了CCL21介导的IRBIT在肝癌中的潜在作用机制，为寻找治疗肝癌的新药物靶点提供了方向。
UEGW由欧洲胃肠病学联合组织(UEG)主办，是欧洲首屈一指的消化病学会议，也是世界领先的胃肠病学活动之一。会议议题涵盖广泛的消化疾病领域，大会以 “共同打造消化健康未来”为理念，世界知名专家聚首一堂，共同探讨该领域的最新进展，从全新的消化系统健康研究，到最先进的临床实践。本届大会共有来自116个国家及地区的8675名医生、研究人员注册参会，共收到2357篇摘要投稿，共有1667篇被大会收录并展示，其中210篇为口头报告。
研究背景
既往研究表明，趋化因子CCL21在肿瘤的恶性生物学行为中起着至关重要的作用。我们团队的研究表明，CCL21可导致细胞内钙（[Ca2+]i）增加，并促进肝癌的迁移和侵袭，表明相关离子通道参与调节[Ca2+]i的激活。IRBIT是IP3受体的结合蛋白，解离的IRBIT可以激活多种离子通道。此外，我们的研究表明CCL21可以诱导IRBIT表达上调。因此，本研究旨在探讨CCL21介导的IRBIT在肝癌中的潜在作用机制，以寻找治疗肝癌的新药物靶点。
研究方法
采用免疫印迹和免疫组织化学方法检测IRBIT在肝癌组织中的表达，通过CCK8试验、Transwell试验和伤口愈合试验，检测在经沉默IRBIT和激活CCL21的肝癌细胞中，细胞的增殖能力和迁移能力。构建shRNA慢病毒载体转染细胞，以沉默IRBIT的表达，在经沉默IRBIT和激活CCL21的肝癌细胞中，通过Western bolt检测E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、ZO-1、波形蛋白和IR-BIT的表达。应用细胞钙成像技术检测CCL21引起的肝癌细胞[Ca2+]i水平，并用不同的钙阻滞剂筛选CCL21相关的肝癌细胞钙通道，并反向验证其作用。
研究结果
与正常肝组织和肝细胞相比，IRBIT在肝癌组织和细胞中的表达明显增加。在Huh7细胞中IR-BIT沉默后，其增殖、迁移和侵袭能力与对照肝细胞相比显著降低，E-cadheren和ZO-1的表达增加，N-cadherin和Vimentin的表达也显著降低，这意味着IRBIT在肝癌细胞中起到促癌作用。
在富含CCL21的细胞培养液中，Huh7细胞的迁移和侵袭能力以及IRBIT的表达均显著提高，提示CCL21可能通过调节IRBIT而促进肝癌细胞的侵袭。研究表明，200 uM CCL21可诱导Huh7细胞[Ca2+]i浓度增加，NCX1抑制剂（一种钙阻滞剂）KB-R7943可显著抑制该浓度。加入KB-R7943和CCL21共培养后，CCL21诱导E-钙粘附素，ZO-1表达增加，N-钙粘附素和波形蛋白表达下降得到有效逆转，提示CCL21可能通过调节IRBIT影响细胞膜上的NCX1通道，介导外部钙内流，促进肝癌的恶性生物学行为。
研究结论
本研究首次揭示了趋化因子CCL21通过IRBIT/NCX1/Ca2+信号通路促进肝癌恶性生物学行为的新机制，为治疗或预防肝癌复发和转移提供了新的理论依据。
原文链接： J. Ding, B. Tuo, R. Xie, X. Jingyu. Study on the Mechanism of Chemokine CCL21 Mediating IRBIT in The Malignant Biological Behavior of Liver Cancer. UEGW 2021 Abstract OP140
（来源：《国际肝病》编辑部）
